Medisinsk mikrobiologi II: Sterilisering, laboratoriediagnostikk og immunrespons

By Nikolas Morein, Merim Kumars and Gerald Dunders

Sterilisering refererer til enhver prosess som eliminerer, dreper eller deaktiverer alle former for liv (spesielt med henvisning til mikroorganismer som sopp, bakterier, virus, sporer, encellede eukaryote organismer som Plasmodium og andre biologiske midler som prioner som er til stede i en spesifikk overflate, gjenstand eller væske. Den kliniske presentasjonen av en smittsom sykdom gjenspeiler interaksjonen mellom verten og mikroorganismen. Laboratoriediagnostikk krever en sammensatt informasjon, inkludert historie, fysisk undersøkelse, radiografiske funn og laboratoriedata. En immunrespons er en reaksjon som oppstår i en organisme med det formål å forsvare seg mot inntrengerne. Disse inntrengerne inkluderer et bredt utvalg av forskjellige mikroorganismer, inkludert virus, bakterier, parasitter og sopp som kan forårsake alvorlige helseproblemer for vertsorganismene hvis de ikke blir fjernet fra kroppen. Innholdet i denne boken: Sterilisering, Fuktig varmesterilisering, Sterilitetssikringsnivå, Tyndallisering, Tørrvarmerilisering, Asepsis, Antiseptisk, Liste over instrumenter brukt i mikrobiologisk sterilisering og desinfeksjon, Antimikrobiell resistens, Flere medikamenteresistens, Overføringsbaserte forholdsregler, Prinsipper for diagnose, Laboratoriediagnose av virusinfeksjoner, In vitro, In vitro til in vivo ekstrapolering, Mikroskopi, Molekylær diagnostikk, Patogenomics, Nucleic syretest, Serologi, antistoff, instrumenter brukt i mikrobiologi, Impedansmikrobiologi, isolasjon, bakteriologisk vannanalyse, analyse, Isolering, bakteriologisk vannanalyse, analyse, Isolering, bakteriologisk vannanalyse, analyse, Immunoassay, Antigen, antistoff microarray, antigen-antistoff-interaksjon, immunsystem, immunrespons, polyklonal B-cellerespons, medfødt immunforsvar, Adaptivt immunsystem, immuntoleranse, medfødt lymfoidcelle, immunostimulerende middel, co-stimulering, betennelse
Authors: Nikolas Morein, Merim Kumars, Gerald Dunders

• Language: Norwegian bokmal
• Publisher: Cambridge Stanford Books
• Release date: Sep 24, 2020
• ISBN: 9781005277185

Book preview

Sterilisering

Sterilisering refererer til enhver metode som eliminerer, dreper eller deaktiverer alle former for liv (spesielt med henvisning til mikroorganismer som illustrert av sopp, bakterier, virus, sporer, encellede eukaryote organismer som illustrert av Plasmodium, etc.) og andre biologiske midler som prioner til stede i en spesifikk overflate, gjenstand eller væske, for eksempel mat eller biologiske avlingsmedier. Sterilisering kan oppnås på forskjellige måter, inkludert varme, kjemikalier, bestråling, høyt trykk og filtrering. Sterilisering skyldes ikke desinfeksjon, desinfisering og pasteurisering ved at disse metodene reduserer i stedet for å eliminere alle livsformer og biologiske stoffer som er til stede. Etter sterilisering blir en gjenstand referert til som steril eller aseptisk.

Applikasjoner

Foods

Et av de første trinnene mot modernisert sterilisering ble gjort av Nicolas Appert som oppdaget at grundig påføring av varme over en passende periode saktet forfallet av matvarer og forskjellige væsker, og bevarte dem for trygt forbruk i lengre tid enn det som var vanlig. Hermetikk av mat er en forlengelse av samme prinsipp og har bidratt til å redusere matbåren sykdom (matforgiftning). En annen metode for sterilisering av matvarer inkluderer matbestråling og høyt trykk (pascalisering). Sterilisering i matvarer er et av de største trinnene for å sikre bevaring av mat i matindustrien. Det er mange teknikker som brukes for å hjelpe denne metoden. En av disse prosessene ville være varmebehandling.Varmebehandling opphører bakterie- og enzymaktivitet som deretter fører til redusert sjanse for mat av lav kvalitet, mens levetiden til ikke-bedervelige matvarer opprettholdes. En spesifikk type varmebehandling som brukes vil være UHT (ultrahøy temperatur) sterilisering. Denne typen varmebehandling fokuserer på sterilisering over 100 grader. To andre typer sterilisering er fuktig og tørr varmesterilisering. Under fuktig varmesterilisering varierer temperaturene som brukes fra 110 til 130 grader celsius. Minste tidsperiode som sterilisering ville finne sted med fuktig varme ville være 20 minutter og 40 minutter å være det maksimale. Scilicet, jo høyere varme, kortere tid for sterilisering.Bruken av tørrvarmesterilisering bruker lengre følsomhetstider som kan vare opptil 2 timer, og som bruker mye høyere temperaturer sammenlignet med fuktig varmesterilisering. Disse temperaturene kan variere fra 160 til 180 grader celsius.

Medisin og kirurgi

Generelt må kirurgiske instrumenter og medisiner som kommer inn i en allerede aseptisk del av kroppen (for eksempel blodomløpet eller som trenger inn i huden) være sterile. Eksempler på slike instrumenter inkluderer skalpeller, hypodermiske nåler og kunstige pacemakere. Dette er foruten viktig ved fremstilling av parenterale legemidler.

Forberedelse av injiserbare medisiner og intravenøse oppløsninger for væskersubstitusjonsbehandling krever ikke bare sterilitet, men i tillegg til velutformede beholdere for å forhindre inntreden av eventuelle legemidler etter innledende produktsterilisering.

De fleste medisinske og kirurgiske apparater som brukes i helsetjenester er laget av materialer som er i stand til å gå under dampsterilisering. Selv om det siden 1950 har vært en økning i medisinsk utstyr og instrumenter laget av materialer (f.eks. Plast) som krever sterilisering ved lav temperatur. Etylenoksydgass har blitt brukt siden 1950-tallet for varme- og fuktighetsfølsomme medisinske apparater. I løpet av de siste 15 årene er et antall nye steriliseringssystemer med lav temperatur (f.eks. Fordampet hydrogenperoksyd, pereddiksyre-nedsenking, ozon) blitt utviklet og brukes til å sterilisere medisinsk utstyr.

Dampsterilisering er den mest brukte og mest pålitelige. Dampsterilisering er ikke-giftig, billig, raskt mikrobicid, sporicide, og varmes raskt gjennom og trengs gjennom stoffer.

Romfartøy

Det er strenge internasjonale regler for å beskytte forurensning av solsystemlegemer fra biologisk materiale fra jorden. Standarder varierer avhengig av både oppdragstypen og dens destinasjon; jo mer sannsynlig en planet anses å være beboelig, jo strengere er kravene.

Mange komponenter av instrumenter som brukes på romfartøyer tåler ikke veldig høye temperaturer, så teknikker som ikke krever overdreven temperatur blir brukt som tolererte, inkludert oppvarming til minst 120 ° C, kjemisk sterilisering, oksidasjon, ultrafiolett og bestråling.

Kvantifisering

Målet med sterilisering er reduksjon av opprinnelig tilstedeværende mikroorganismer eller andre potensielle patogener. Steriliseringsgraden uttrykkes tydelig med multipler av desimal reduksjonstid, eller D-verdi, som angir tiden som er nødvendig for å redusere det første tallet N 0 til en tidel (10 - 1) av den opprinnelige verdien. Så er antall mikroorganismer N etter steriliseringstid t gitt av:

N ∕ N 0 = 10 (- t ∕ D)

D-verdien er en tjeneste for steriliseringsbetingelser og varierer med typen mikroorganisme, temperatur, vannaktivitet, pH osv. For dampsterilisering (se nedenfor) er temperaturen, i grader Celsius, vanligvis gitt som en indeks.

Teoretisk sett er sannsynligheten for overlevelse av en individuell mikroorganisme aldri null. For å kompensere for dette, brukes ofte overkill-handlingen. Ved å bruke overkill-handlingen utføres sterilisering ved sterilisering lenger enn nødvendig for å drepe bioburden som er til stede på eller i gjenstanden som blir sterilisert. Dette gir et sterilitetssikringsnivå (SAL) som er lik sannsynligheten for en ikke-steril enhet.

For høyrisikosøknader, som illustrert av medisinsk utstyr og injeksjoner, er et sterilitetssikringsnivå på minst 10 −6nødvendig av USAs Food and Drug Administration (FDA).

Varme

Damp

En mye brukt handling for varmesterilisering er autoklaven, noen ganger kalt en omformer eller dampsterilisator. Autoklaver bruker damp som er oppvarmet til 121–134 ° C (250–273 ° F) under trykk. For å oppnå sterilitet plasseres gjenstanden i et kammer og varmes opp med injisert damp til gjenstanden når et temperatur- og tidsinnstilt punkt. Nesten all luft fjernes fra kammeret, på grunn av luft er uønsket i den fuktige varmesteriliseringsmetoden (dette er en egenskap som skiller seg fra en typisk trykkoker som brukes til matlaging). Artikkelen holdes ved temperatursettpunktet i en periode som varierer avhengig av hvilken biobelastning som er til stede på gjenstanden som steriliseres og dens motstand (D-verdi) mot dampsterilisering. En generell syklus vil være mellom 3 og 15 minutter,(avhengig av den genererte varmen) ved 121 ° C (250 ° F) ved 100 kPa (15 psi), noe som er tilstrekkelig til å gi et sterilitetssikringsnivå på 10-4for et produkt med en biobyrde på 10 ⁶ og en D-verdi på 2,0 minutter. Etter sterilisering må væsker i en autoklav under trykk avkjøles sakte for å unngå å koke over når trykket frigjøres. Dette kan oppnås ved gradvis å trykke ned steriliseringskammeret og la væskene fordampe under undertrykk, mens innholdet avkjøles.

Riktig autoklavbehandling vil inaktivere alle resistente bakteriesporer på samme måte for sopp, bakterier og virus, men forventes ikke å eliminere alle prioner, som varierer i deres resistens. For eliminering av prion angir ulike anbefalinger 121–132 ° C (250–270 ° F) i 60 minutter eller 134 ° C (273 ° F) i minst 18 minutter. 263K scrapie-prionen inaktiveres relativt raskt ved slike steriliseringsprosedyrer; Selv om en annen stamme av scrapie og stammer av Creutzfeldt-Jakob skrantende (CKD) og bovin spongiform encefalopati( BSE) er mer motstandsdyktige. Ved å bruke mus som forsøksdyr, viste et eksperiment at oppvarming av BSE positivt hjernevev ved 134–138 ° C (273–280 ° F) i 18 minutter bare resulterte i en reduksjon på 2,5 log i prion-infektivitet.

De fleste autoklaver har målere og diagrammer som registrerer eller viser informasjon, spesielt temperatur og trykk som en tjeneste for tiden. Informasjonen blir sjekket for å sikre at betingelsene som kreves for sterilisering er oppfylt. Indikatorbånd plasseres ofte på produktpakkene før autoklavering, og noen emballasje inneholder indikatorer. Indikatoren endrer farge når den utsettes for damp, og gir en visuell bekreftelse.

Bioindikatorer kan dessuten brukes til uavhengig å bekrefte utførelse av autoklaver. Enkle bioindikatorenheter er kommersielt tilgjengelige, basert på mikrobielle sporer. De fleste inneholder sporer av den varmebestandige mikroben Geobacillus stearothermophilus (tidligere Bacillus stearothermophilus), som er ekstremt motstandsdyktig mot dampsterilisering. Biologiske indikatorer kan ha form av glassflasker med sporer og flytende medier, eller som sporer på papirstrimler i glasskonvolutter. Disse indikatorene er plassert på steder der det er vanskelig for damp å nå for å bekrefte at damp trenger inn der.

For autoklavering er rengjøring kritisk. Ekstremt biologisk materiale eller sot kan beskytte organismer mot dampinntrenging. Riktig rengjøring kan oppnås gjennom fysisk skrubbing, sonikering, ultralyd eller pulserende luft.

Trykkkoking og hermetisering er analog med autoklavering, og når maten utføres korrekt, blir maten steril.

Fuktig varme forårsaker ødeleggelse av mikroorganismer ved denaturering av makromolekyler, hovedsakelig proteiner. Denne handlingen er en raskere metode enn sterilisering av tørr varme.

Tørr varme

Tørr varme var den første virkningen av sterilisering og er en lengre metode enn fuktig varmesterilisering. Ødeleggelsen av mikroorganismer ved bruk av tørr varme er et gradvis fenomen. Med lengre eksponering for dødelige temperaturer øker antallet drepte mikroorganismer. Tvungen ventilasjon av varm luft kan brukes til å øke hastigheten som varmen overføres til en organisme og redusere temperaturen og mengden tid som trengs for å oppnå sterilitet. Ved høyere temperaturer kreves kortere eksponeringstid for å drepe organismer. Dette kan redusere varmeindusert skade på matprodukter.

Standardinnstillingen for en varmluftsovn er minst to timer ved 160 ° C. En rask handling varmer luft til 190 ° C i 6 minutter for uinnpakket gjenstander og 12 minutter for innpakkete gjenstander. Tørr varme har fordelen at den kan brukes på pulver og andre varmestabile gjenstander som påvirkes negativt av damp (f.eks. Det forårsaker ikke rust av stålgjenstander).

Flaming

Flamming gjøres for å inokulere løkker og rette ledninger i mikrobiologiske laboratorier for stripping. Å forlate løkken i flammen til en Bunsen-brenner eller alkoholbrenner til den lyser rødt, sikrer at et infeksjonsmiddel blir inaktivert. Dette brukes tydelig til små metall- eller glassgjenstander, men ikke til store gjenstander (se forbrenning nedenfor). Selv om det under den første oppvarmingen kan sprøytes smittende materiale fra trådoverflaten før det drepes, og forurenser nærliggende overflater og gjenstander. Konklusivt er det utviklet spesielle varmeovner som omgir inokulasjonssløyfen med et oppvarmet bur, noe som sikrer at slikt sprayet materiale ikke forurenser området. Et annet problem er at gassflammer kan etterlate karbon eller andre rester på gjenstanden hvis gjenstanden ikke er oppvarmet nok.En variasjon på flamming er å dyppe gjenstanden i en 70% eller mer konsentrert etanoloppløsning, og deretter berøre gjenstanden kort til en Bunsen-brennerflam. Etanolen vil antenne og brenne av raskt, og etterlate mindre rester enn en gassflamme

Forbrenning

Forbrenning er en avfallsbehandlingsmetode som innebærer forbrenning av organiske stoffer i avfallsmaterialer. Denne handlingen i tillegg brenner enhver organisme til aske. Det brukes til å sterilisere medisinsk og annet biofarlig avfall før det kasseres med ikke-farlig avfall. Bacteria forbrenningsovner er miniovner som forbrenner og dreper mikroorganismer som kan være på en inokuleringssløyfe eller -tråd.

Tyndallization

Oppkalt etter John Tyndall, er en foreldet og omstendelig metode designet for å redusere aktivitetsnivået til sporulerende bakterier som er igjen av en enkel vannkokende handling. Metoden innebærer koking i en periode (vanligvis 20 minutter) ved atmosfæretrykk, avkjøling, inkubering i et døgn, og deretter gjentar metoden totalt tre til fire ganger. Inkubasjonsperiodene skal la varmebestandige sporer som overlever den foregående kokeperiode spire for å danne det varmefølsomme vegetative (voksende) stadiet, som kan drepes ved neste koketrinn. Dette er effektivt på grunn av at mange sporer blir stimulert til å vokse av varmesjokket. Driftsformen fungerer bare for medier som kan støtte bakterievekst, og vil ikke sterilisere ikke-næringsrike underlag som vann. Er foruten ineffektiv mot prions.

Sterilisatorer av glassperler

Sterilisatorer av glassperler fungerer ved å varme opp glassperler til 250 ° C. Instrumenter blir deretter raskt sluppet inn i disse glassperlene, som varme opp gjenstanden mens de fysisk skraper forurensninger fra overflaten. Sterilisatorer av glassperler var en gang en vanlig steriliseringshandling brukt i tannlegekontorer i tillegg som biologiske laboratorier, men er ikke godkjent av US Food and Drug Administration (FDA) og Centers for ailing Control and Prevention( CDC) som skal brukes som et sterilisatorer siden 1997. De er ennå populære innen europeisk og israelsk tannlegepraksis, til tross for at det ikke er noen gjeldende evidensbaserte retningslinjer for bruk av denne sterilisatoren.

Kjemisk sterilisering

Kjemikalier brukes dessuten til sterilisering. Oppvarming er en pålitelig måte å fjerne gjenstander fra alle overførbare midler, men det er ikke alltid aktuelt om det vil skade varmefølsomme materialer som illustrert av biologiske materialer, fiberoptikk, elektronikk og mange plastmaterialer. I disse situasjonene kan kjemikalier, enten i gassformet eller flytende form, brukes som steriliserende midler. Mens bruk av gass og flytende kjemiske steriliser unngår problemet med varmeskader, må brukerne sørge for at gjenstanden som skal steriliseres er kjemisk kompatibel med steriliseringsmiddelet som brukes, og at steriliseringsmiddelet er i stand til å nå alle overflater som må steriliseres (vanligvis ikke kan trenger gjennom emballasje). På samme måte gir bruken av kjemiske steriliser nye utfordringer for sikkerheten på arbeidsplassen,da egenskapene som gjør kjemikalier effektive steriliser, vanligvis gjør dem skadelige for mennesker. Driftsmåten for å fjerne steriliserende rester fra de steriliserte materialene varierer avhengig av kjemikalien og metoden som brukes.

Etylenoksyd

Etylenoksyd (EO, EtO) gassbehandling er en av de vanlige metodene som brukes til å sterilisere, pasteurisere eller desinfisere gjenstander på grunn av dets store materialkompatibilitet. Det er foruten vant til metodeartikler som er følsomme for prosessering med andre metoder, som illustrert ved stråling (gamma, elektronstråle, røntgen), varme (fuktig eller tørr) eller andre kjemikalier. Etylenoksydbehandling er den vanligste kjemiske steriliseringsvirkningen, brukt i omtrent 70% av total sterilisering, og for over 50% av all medisinsk engangsutstyr.

Etylenoksydbehandling gjennomføres konsekvent mellom 30 og 60 ° C (86 og 140 ° F) med relativ fuktighet over 30% og en gasskonsentrasjon mellom 200 og 800 mg / l. Vanligvis varer metoden i flere timer. Etylenoksyd er svært effektivt, ettersom det trenger gjennom alle porøse materialer, og det kan trenge gjennom noen plastmaterialer og filmer. Etylenoksid dreper alle kjente mikroorganismer, som illustrert av bakterier (inkludert sporer), virus og sopp (inkludert gjær og mugg), og er kompatible med nesten alle materialer, selv når de gjentatte ganger brukes. Det er brannfarlig, giftig og kreftfremkallende; selv om, bare med et rapportert potensial for noen skadelige helseeffekter når de ikke brukes i samsvar med publiserte krav. Etylenoksydsterilisatorer og -prosesser krever biologisk validering etter sterilisatorinstallasjon,betydelige reparasjoner eller metodendringer.

Den tradisjonelle metoden består av en forkondisjoneringsfase (i et eget rom eller en celle), en prosesseringsfase (tydeligere i et vakuumbeholder og noen ganger i et trykkklassifisert kar), og en luftingsfase (i et eget rom eller en celle) for å fjerne EO-rester og lavere biprodukter som illustrert med etylenklorhydrin (EC eller ECH) og, av mindre betydning, etylenglykol (EG). En alternativ metode, kjent som alt-i-ett-prosessering, eksisterer dessuten for noen produkter der alle tre faser utføres i vakuum- eller trykkklassifisert kar. Dette sistnevnte alternativet kan lette raskere ved og med stor prosesseringstid og spredning av rester.

Den vanligste EO-prosesseringshandlingen er gasskammeraksjonen. For å dra nytte av stordriftsfordeler har EO tradisjonelt blitt levert ved å fylle et stort kammer med en kombinasjon av gassformig EO, enten som ren EO, eller med andre gasser brukt som fortynningsmidler; fortynningsmidler inkluderer klorfluorkarboner (CFC), hydroklorfluorkarboner (HCFC) og karbondioksid.

Etylenoksyd er ennå mye brukt av produsenter av medisinsk utstyr. Siden EO er eksplosivt i konsentrasjoner over 3%, ble EO tradisjonelt forsynt med en inert bærergass, som illustrert av en CFC eller HCFC. Bruk av CFC eller HCFC som bærergass ble forbudt på grunn av bekymring for ozonnedbrytning. Disse halogenerte hydrokarboner erstattes av systemer som bruker 100% EO, på grunn av forskrifter og høye kostnader for blandingene. På sykehus bruker de fleste EO-sterilisatorer engangskassetter på grunn av bekvemmeligheten og brukervennligheten sammenlignet med de tidligere avløpede gassflasker i EO-blandinger.

Det er viktig å overholde de spesifiserte grensene for EO-rester i og / eller på bearbeidede produkter, pasient- og helsepersonellets myndigheter, eksponering etter operatør, under lagring og håndtering av EO-gassflasker og miljøutslipp produsert ved bruk av EO.

Den amerikanske arbeidsmiljøadministrasjonen (OSHA) har satt den tillatte eksponeringsgrensen (PEL) til 1 ppm - beregnet som et åtte timers tidsvektet gjennomsnitt (TWA) - og 5 ppm som en 15-minutters utflukt grense (EL). NIOSH (NIOSH) øyeblikkelig farlig for livs- og helsegrense (IDLH) for EO er 800 ppm. Luktgrensen er rundt 500 ppm, så EO er umerkelig inntil konsentrasjoner er godt over OSHA PEL. Konklusivt anbefaler OSHA at kontinuerlige gassovervåkingssystemer brukes til å beskytte arbeidere som bruker EO til prosessering.

Nitrogendioksid

Nitrogen dioxide (NO 2) gass er en rask og effektiv sterilisator for bruk mot et bredt spekter av mikroorganismer, inkludert vanlige bakterier, virus og sporer. De unike fysiske egenskapene til NO 2- gass ​​muliggjør spredning av steriliserende stoffer i et lukket miljø ved romtemperatur og atmosfæretrykk. Mekanismen for dødelighet er nedbrytningen av DNA i sporekjernen gjennom nitrering av fosfatryggraden, som dreper den utsatte organismen når den absorberer NO 2. Denne nedbrytningen skjer ved selv lave konsentrasjoner av gassen. NO 2 har et kokepunkt på 21 ° C ved havoverflaten, noe som resulterer i et relativt høyt mettet damptrykk ved omgivelsestemperatur. På grunn av dette, flytende NO2 kan brukes som en passende kilde for steriliseringsgassen. Flytende NO 2 blir ofte referert til ved den benevnelse av sin dimer, dinitrogentetraoksyd (N 2 O 4). På samme måte sikrer de lave konsentrasjonsnivåer som er nødvendig, kombinert med det høye damptrykk, at det ikke oppstår kondens på anordningene som blir sterilisert. Dette betyr at det ikke er nødvendig med lufting av enhetene umiddelbart etter steriliseringssyklusen. NO 2 er dessuten mindre etsende enn andre steriliserende gasser, og er kompatibel med de fleste medisinske materialer og lim.

Den mest resistente organismen (MRO) mot sterilisering med NO 2- gass ​​er sporen til Geobacillus stearothermophilus, som er den samme MRO for både damp- og hydrogenperoksydsteriliseringsprosesser. Sporeformen til G. Stearothermophilus har gjennom årene blitt godt karakterisert som en biologisk indikator i steriliseringsapplikasjoner. Mikrobiell inaktivering av G. Stearothermophilus med NO 2gass ​​fortsetter raskt på en log-lineær måte, som er typisk for en annen steriliseringsprosess. Noxilizer, Inc. har kommersialisert denne teknologien for å tilby kontraktsteriliseringstjenester for medisinsk utstyr på Baltimore, Maryland (USA). Dette er påvist i Noxilizers laboratorium i flere studier og støttes av publiserte rapporter fra andre laboratorier. Disse samme egenskapene tillater dessuten raskere fjerning av steriliseringsmiddelet og restgassene gjennom lufting av det lukkede miljøet. Kombinasjonen av rask dødelighet og enkel fjerning av gassen muliggjør kortere perioder med store sykluser under steriliseringsmetoden (eller dekontaminering) og et lavere nivå av steriliserende rester enn det som er funnet ved andre steriliseringsmetoder.

Ozon

Ozon brukes i industrielle omgivelser for å sterilisere vann og luft, i tillegg som desinfeksjonsmiddel for overflater. Det har fordelen av å kunne oksidere mest organisk materiale. Imidlertid er det en giftig og ustabil gass som må produseres på stedet, så det er ikke praktisk å bruke i mange omgivelser.

Ozon gir mange fordeler som steriliserende gass; ozon er et veldig effektivt steriliseringsmiddel på grunn av dets sterke oksidasjonsegenskaper (E = 2.076 vs SHE) som er i stand til å ødelegge et bredt spekter av patogener, inkludert prioner, uten behov for å håndtere farlige kjemikalier siden ozonet genereres i sterilisatoren fra medisinsk -grad oksygen. Den høye reaktiviteten til ozon gjør at ozon i avfall kan ødelegges ved å passere over en enkel katalysator som vender tilbake til oksygen og sikrer at syklustiden er relativt kort. Ulempen med å bruke ozon er at gassen er veldig reaktiv og veldig farlig. NIOSHs øyeblikkelig farlige for livs- og helsegrense (IDLH) for ozon er 5 ppm, 160 ganger mindre enn 800 ppm IDLH for etylenoksyd. NIOSH og OSHA har satt PEL for ozon til 0,1 ppm, beregnet som et åtte timers tidsvektet gjennomsnitt. Produsentene av sterilgasser inkluderer mange sikkerhetsfunksjoner i sine produkter, men forsvarlig praksis er å sørge for kontinuerlig overvåking av eksponering for ozon, i regel for å gi en hurtig advarsel i tilfelle en lekkasje. Monitorer for å bestemme eksponering for ozon på arbeidsplassen er kommersielt tilgjengelige.

Glutaraldehyd og formaldehyd

Glutaraldehyd- og formaldehydløsninger (også brukt som fikseringsmidler) er aksepterte flytende steriliseringsmidler, forutsatt at nedsenkingstiden er tilstrekkelig lang. Å ta livet av alle sporer i en klar væske kan ta opptil 22 timer med glutaraldehyd og enda lenger med formaldehyd. Tilstedeværelsen av faste partikler kan forlenge den nødvendige perioden eller gjøre behandlingen ineffektiv. Sterilisering av vevblokker kan ta mye lengre tid på grunn av tiden som kreves for at fikseringsmidlet trenger inn. Glutaraldehyd og formaldehyd er flyktige og giftige ved både hudkontakt og innånding. Glutaraldehyd har kort holdbarhet (<2 uker) og er dyrt. Formaldehyd er rimeligere og har mye lengre holdbarhet hvis noe metanol tilsettes for å hemme polymerisasjon til paraformaldehyd, men er mye mer flyktig.Formaldehyd brukes dessuten som et gassformig steriliseringsmiddel; i dette tilfellet blir det fremstilt på stedet ved depolymerisasjon av fast paraformaldehyd. Mange vaksiner, som illustrert av den opprinnelige Salk polio-vaksinen, er sterilisert med formaldehyd.

Hydrogenperoksid

Hydrogenperoksyd, i både flytende og som fordampet hydrogenperoksyd (VHP), er et annet kjemisk steriliseringsmiddel. Hydrogenperoksyd er en sterk oksidant, som gjør det mulig å ødelegge et bredt spekter av patogener. Hydrogenperoksyd brukes til å sterilisere varme- eller temperatursensitive artikler, som illustrert av stive endoskop. Ved medisinsk sterilisering brukes hydrogenperoksyd i høyere konsentrasjoner, fra rundt 35% opp til 90%. Den største fordelen med hydrogenperoksyd som steriliseringsmiddel er den korte syklustiden. Mens syklustiden for etylenoksyd kan være 10 til 15 timer, har noen moderne hydrogenperoksydsterilisatorer en syklustid på så kort som 28 minutter.

Ulemper med hydrogenperoksyd inkluderer materialkompatibilitet, lavere kapasitet for penetrering og operatørens helserisiko. Produkter som inneholder cellulose, som illustrert med papir, kan ikke steriliseres ved bruk av VHP, og produkter som inneholder nylon kan bli sprø. Den gjennomtrengende evnen til hydrogenperoksyd er ikke så god som etylenoksyd, og det er derfor begrensninger på lengden og diameteren på lumen til gjenstander som effektivt kan steriliseres. Hydrogenperoksyd er et primært irriterende middel, og kontakten av den flytende løsningen med huden vil forårsake bleking eller sårdannelse avhengig av konsentrasjonen og kontakttiden. Den er relativt giftfri når den fortynnes til lave konsentrasjoner, men er en farlig oksidasjonsmiddel ved høye konsentrasjoner (> 10% vekt / vekt). Dampen er foruten farlig, hovedsakelig påvirker øynene og luftveiene.Selv kortsiktige eksponeringer kan være farlige, og NIOSH har satt IDLH til 75 ppm, mindre enn en tidel av IDLH for etylenoksyd (800 ppm). Langvarig eksponering for lavere konsentrasjoner kan forårsake varig lungeskade, og OSHA har derfor satt den tillatte eksponeringsgrensen til 1.0 ppm, beregnet som et tidsvektet gjennomsnitt på åtte timer. Sterilisatorprodusenter legger stor vekt på å gjøre produktene sine trygge gjennom nøye utforming og integrering av mange sikkerhetsfunksjoner, men det er ennå eksponeringer på arbeidsplassen av hydrogenperoksyd fra gasssterilisatorer dokumentert i FDA MAUDE-databasen. Når du bruker noen form for gasssterilisator, bør forsvarlig arbeidspraksis inkludere god ventilasjon, en kontinuerlig gassmonitor for hydrogenperoksyd og god arbeidspraksis og trening.

Dampet hydrogenperoksyd (VHP) brukes til å sterilisere store lukkede og forseglede områder, som illustrert av hele rom og flyinnredning.

Selv om det er giftig, brytes VHP på kort tid til vann og oksygen.

Pereddiksyre

Pereddiksyre (0,2%) er et anerkjent steriliseringsmiddel av FDA for bruk i sterilisering av medisinsk utstyr som illustrert ved endoskop.

Potensial for kjemisk sterilisering av prioner

Prioner er svært motstandsdyktige mot kjemisk sterilisering. Behandling med aldehyder, som illustrert av formaldehyd, har faktisk vist seg å øke prionresistensen. Hydrogenperoksyd (3%) i en time viste seg å være ineffektivt, noe som ga mindre enn 3 logger (10 −3) reduksjon i forurensning. Jod, formaldehyd, glutaraldehyd og pereddiksyre klarer dessuten ikke denne testen (en times behandling). Bare klor, fenolforbindelser, guanidiniumtiocyanat og natriumhydroksyd reduserer prionnivåene med mer enn 4 tømmerstokker; klor (for etsende til bruk på visse gjenstander) og natriumhydroksyd er de mest konsistente. Mange studier har vist effektiviteten av natriumhydroksyd.

Strålingsterilisering

Sterilisering kan oppnås ved bruk av elektromagnetisk stråling, som illustrert av elektronstråler, røntgenstråler, gammastråler eller bestråling av subatomære partikler. Elektromagnetisk eller partikkelformig stråling kan være energisk nok til å ionisere atomer eller molekyler (ioniserende stråling), eller mindre energisk (ikke-ioniserende stråling).

Ikke-ioniserende strålingssterilisering

Bestråling av ultrafiolett lys (UV fra en bakteriedrepende lampe) er nyttig for sterilisering av overflater og noen transparente gjenstander. Mange gjenstander som er gjennomsiktige for synlig lys, absorberer UV. UV-bestråling brukes rutinemessig for å sterilisere interiøret i biologiske sikkerhetsskap mellom bruksområder, men er ineffektivt i skyggefulle områder, inkludert områder under skitt (som kan bli polymerisert etter langvarig bestråling, slik at det er veldig vanskelig å fjerne). Den skader dessuten noen plast, som illustrert med polystyrenskum hvis de blir utsatt for lengre tid.

Ioniserende strålingssterilisering

Sikkerheten til bestrålingsanlegg er regulert av FNs internasjonale atomenergibyrå og overvåkes av de forskjellige nasjonale kjernefysiske reguleringsutvalg (NRC). Stråleeksponeringsulykkene som har skjedd i det siste, er dokumentert av byrået og analysert grundig for å bestemme årsaken og forbedringspotensialet. Slike forbedringer blir deretter pålagt å ettermontere eksisterende fasiliteter og fremtidig utforming.

Gamma-stråling er veldig gjennomtrengende, og brukes tydelig til sterilisering av medisinsk engangsutstyr, som illustrert av sprøyter, nåler, kanyler og IV-sett, og mat. Den sendes ut av en radioisotop, vanligvis kobolt-60(⁶⁰Co) eller cesium-137(¹³⁷Cs), som har fotonenergier på henholdsvis 1,3 og 0,66 MeV.

Bruk av radioisotop krever skjerming for sikkerheten til operatørene mens den er i bruk og lagring. Med de fleste konstruksjoner senkes radioisotopen ned i et vannfylt kildelagringsbasseng, som absorberer stråling og lar vedlikeholdspersonell komme inn i strålingsskjoldet. En variant holder radioisotopen til enhver tid under vann og senker produktet til å bli bestrålet i vannet i hermetisk forseglede klokker; det er heller ikke nødvendig med skjerming for slike design. En annen uvanlig brukt design bruker tørr lagring, og gir bevegelige skjold som reduserer strålingsnivået i områder av bestrålingskammeret. En hendelse i Decatur, Georgia, USA, der vannløselig cesium-137 lekket ut i kildelagringsbassenget, som krever NRC-inngrep, har ført til at bruken av denne radioisotopen nesten helt ble avviklet til fordel for det mer kostbare,ikke-vannløselig kobolt-60. Cobalt-60 gamma-fotoner har med referanse til det dobbelte av energien, og uunngåelig større gjennomtrengende rekkevidde, av cesium-137-produsert stråling.

Elektronstrålebehandling brukes dessuten tydelig for sterilisering. Elektronstråler bruker en on-off teknologi og gir en mye høyere doseringshastighet enn gamma eller røntgenstråler. På grunn av den høyere dosehastigheten, er mindre eksponeringstid nødvendig, og dermed reduseres eventuell potensiell nedbrytning for polymerer. På grunn av elektroner har en ladning, er elektronstråler mindre gjennomtrengende enn både gamma og røntgenstråler. Fasiliteter er avhengige av betydelige betongskjold for å beskytte arbeidere og miljøet mot eksponering for stråling.

Høyenergi røntgenstråler (produsert av bremsstrahlung) tillater bestråling av store pakker og paller med mye medisinsk utstyr. De er tilstrekkelig gjennomtrengende til å behandle flere pallbelastninger med lav-tetthetspakker med meget gode doseuniformitetsforhold. Røntgensterilisering krever ikke kjemisk eller radioaktivt materiale: høyenergi røntgenstråler genereres med høy intensitet av en røntgengenerator som ikke krever skjerming når den ikke er i bruk. Røntgenstråler genereres ved å bombardere et tett materiale (objektivt) som illustrert av tantal eller wolfram med høyenergi-elektroner, i en metode kjent som bremsstrahlung-konvertering. Disse systemene er energieffektive, og krever mye mer elektrisk energi enn andre systemer for samme effekt.

Bestråling med røntgenstråler, gammastråler eller elektroner gjør ikke materialer radioaktive, fordi energien som brukes er for lav. Gjennomgående er det nødvendig med en energi på minst 10 MeV for å indusere radioaktivitet i et materiale. Nøytroner og partikler med svært høy energi kan gjøre materialer radioaktive, men har god penetrering, mens partikler med lavere energi (annet enn nøytroner) ikke kan gjøre materialer radioaktive, men har dårligere penetrering.

Sterilisering ved bestråling med gammastråler kan selv om det påvirker materialegenskapene.

Bestråling brukes av United States Postal-funksjonen til å sterilisere post i Washington, DC-området. Noen matvarer (f.eks. Krydder og kjøttpålegg) steriliseres ved bestråling.

Subatomiske partikler kan være mer eller mindre gjennomtrengende og kan genereres av en radioisotop eller en dings, avhengig av type partikkel.

Steril filtrering

Væsker som vil bli skadet av varme, bestråling eller kjemisk sterilisering, som illustrert ved medikamentoppløsning, kan steriliseres ved mikrofiltrering ved bruk av membranfilter. Denne handlingen brukes tydelig til varmelabile legemidler og proteinløsninger i medisinsk behandling. Et mikrofilter med porestørrelse som vanligvis er 0,22 um, vil vanligvis effektivt fjerne mikroorganismer. Enkelte stafylokokkarter har, selv om det er vist seg å være fleksible nok til å passere gjennom 0,22 um filtre. Ved prosessering av biologiske må virus fjernes eller inaktiveres, noe som krever bruk av nanofiltre med mindre porestørrelse (20–50 nm). Mindre porestørrelser senker strømningshastigheten, så i regel for å oppnå høyere total gjennomstrømning eller for å unngå for tidlig blokkering, kan pre-filtre brukes til å beskytte små poremembranfilter.Tangential flow filtration (TFF) og alternerende tangential flow (ATF) systemer i tillegg reduserer partikkelakkumulering og blokkering.

Membranfilter som brukes i produksjonsprosesser er tydelig laget av materialer som illustrert av blandet celluloseester eller polyetersulfon (PES). Filtreringsutstyret og filtrene i seg selv kan kjøpes som pre-steriliserte engangsenheter i forseglet emballasje eller må steriliseres av brukeren, konsekvent ved autoklavering ved en temperatur som ikke skader de skjøre filtermembranene. For å sikre at funksjonen til filteret fungerer, er membranfiltrene integritetstestet etter bruk og noen ganger før bruk. Den ikke-destruktive integritetstesten forsikrer at filteret er uskadet og er et forskriftskrav. Vanligvis blir terminal farmasøytisk steril filtrering utført inne i et renrom for å forhindre forurensning.

Bevaring av sterilitet

Instrumenter som har gjennomgått sterilisering kan opprettholdes i en slik tilstand ved inneslutning i forseglet emballasje inntil bruk.

Aseptisk teknikk er handlingen for å opprettholde sterilitet under prosedyrer.

Fuktig varmesterilisering

Fuktig varmesterilisering beskriver steriliseringsteknikker som bruker varm luft som er tungt belastet med vanndamp og hvor denne fuktigheten spiller den spesielle rollen i steriliseringen. Å varme opp en artikkel er en av de tidligste former for sterilisering som er praktisert. De forskjellige prosedyrene som brukes for å utføre fuktig varmesteriliseringsmetode forårsaker ødeleggelse av mikroorganismer ved denaturering av makromolekyler.

Beskrivelse

Å varme opp en artikkel er en av de tidligste former for sterilisering som er praktisert. Fuktige varmesteriliseringsprosesser steriliserer ved bruk av varm luft som er tungt belastet med vanndamp, noe som spiller den viktigste rollen i steriliseringen. Å koke en prøve i 30 minutter eller mer vil drepe praktisk talt alle vegetative celler som er til stede, men vil ikke drepe sporer, som kan spire kort tid etter og fortsette veksten. Samlet sett er koking en utilstrekkelig handling for å oppnå sterilisering.

Handling mot mikroorganismer

Fuktig varme forårsaker ødeleggelse av mikroorganismer ved denaturering av makromolekyler, hovedsakelig proteiner. Destruksjon av celler ved lysering kan dessuten spille en rolle. Mens sterilitet innebærer ødeleggelse av frittlevende organismer som kan vokse i en prøve, innebærer sterilisering ikke nødvendigvis ødeleggelse av smittestoffer. Prioner er et eksempel på et smittestoff som kan overleve sterilisering ved fuktig varme, avhengig av forhold.

Validering

For å lette effektiv sterilisering med damp og trykk, er det flere metoder for verifisering og indikasjon brukt; disse inkluderer fargeskiftende indikatorbånd og biologiske indikatorer. Ved bruk av biologiske indikatorer steriliseres prøver som inneholder sporer av varmebestandige mikrober som illustrert av Geobacillus stearothermophilis ved siden av en standardbelastning, og blir deretter inkubert i sterile medier (ofte inneholdt i prøven i en glassampule som skal brytes etter sterilisering). En fargeendring i media (indikerer syreproduksjon av bakterier; krever at mediet formuleres for dette formålet), eller utseendet til uklarhet (tåkelighet som indikerer lysspredning av bakterieceller) indikerer at sterilisering ikke ble oppnådd og steriliseringssyklusen kan trenge revisjon eller forbedring.

Metoder som brukes

Tyndallization

En mer effektiv handling er å bruke tre påfølgende dampbehandlinger for å oppnå sterilisering i løpet av tre dager. Dette fungerer ved å drepe vegetative celler, tillater spiring av overlevende sporer og drepe de resulterende vegetative celler før de har tid til å danne sporer. Eventuelle overlevende sporer fra den første behandlingen, eller tilfeldigvis dannede sporer i løpet av den første inkubasjonsperioden, blir drept i en tredje dampsyklus.

Høytrykk

En mer tydelig brukt handling når utvidet varme ikke er en bekymring er å bruke en autoklav eller trykkoker. Ved sterilisering på denne måten plasseres prøver i et dampkammer på en hylle eller hevet gulv, og kammeret lukkes og varmes opp slik at damp tvinger luft ut av ventilasjonsåpningene eller eksosene. Trykk blir deretter brukt slik at den innvendige temperaturen når 121 ° C (250 ° F), og denne temperaturen holdes i mellom 15 og 30 minutter. Denne forhøyede temperaturen og trykket er tilstrekkelig til å sterilisere prøver av eventuelle tydelig påtrådte mikrober eller sporer. Kammeret får deretter avkjøles sakte eller ved passiv varmeavledning; det er sjelden at tvangsavkjøling påføres, eller at trykket luftes bevisst. Trykksterilisering er den rådende handlingen som brukes til medisinsk sterilisering av varmebestandige verktøy,og for sterilisering av materialer for mikrobiologi og andre felt som krever aseptisk teknikk.

I tilfeller der gjenstander må steriliseres for øyeblikkelig bruk, kan flashsterilisering anvendes. Flash-teknikker kjører konsekvent i minst mulig tid, temperatur eller trykk, og kan ofre noen sikkerhetsforhold, som illustrert av evnene til å validere med biologiske indikatorer eller forhindre forurensning. Ytterligere protokoller tas konsekvent for å dempe ofrene; flash steriliseringsutstyr oppbevares ofte i et operasjonsroms sterile felt, dampgjennomtrengende beskyttende emballasje kan brukes til å pakke gjenstander, og spesielt konstruerte systemer for stiv sterilisering kan gjenbrukes.

Sterilitetssikringsnivå

I mikrobiologi er sterilitetssikringsnivå (SAL) sannsynligheten for at en enkelt enhet som har blitt utsatt for sterilisering likevel forblir ikke-steril.

Det er aldri mulig å bevise at alle organismer er blitt ødelagt, ettersom sannsynligheten for overlevelse av en individuell mikroorganisme aldri er null. Så SAL brukes til å uttrykke sannsynligheten for overlevelse. Slik som produsenter av medisinske apparater utformer sine steriliseringsprosesser for en ekstremt lav SAL, som illustrert av 10 −6, som er 1 til 1 000 000 sjansen for en ikke-steril enhet. SAL beskriver dessuten drepeeffektiviteten til en steriliseringsmetode. En veldig effektiv steriliseringsmetode har veldig lav SAL.

Tyndallization

Tyndallisering er en metode fra det nittende århundre for sterilisering av stoffer, vanligvis mat, oppkalt etter dens oppfinner, forsker John Tyndall, som kan brukes til å drepe varmebestandige endosporer. Til tross for ansett som gammeldags, er den ennå brukt av og til.

En enkel og effektiv steriliserende handling som tydelig brukes i dag er autoklavering: oppvarming av stoffet som steriliseres til 121 ° C i 15 minutter i et presset system. Hvis autoklavering ikke er mulig på grunn av mangel på utstyr, eller behovet for å sterilisere noe som ikke tåler den høyere temperaturen, kan upressert oppvarming i en lengre periode ved en temperatur på opptil 100 ° C, vannets kokepunkt, bli brukt. Varmen vil drepe bakteriecellene; selv om bakteriesporer som senere kan spire til bakterieceller kan overleve. Kan brukes til å ødelegge sporer.

Tyndallisering består egentlig av å varme opp stoffet til kokepunkt (eller bare litt under kokepunktet) og holde det der i 15 minutter, tre dager i serie. Etter hver oppvarming vil hvileperioden tillate sporer som har overlevd å spire til bakterieceller; disse cellene blir drept ved neste dags oppvarming. I hvileperioder holdes stoffet som steriliseres i et fuktig miljø ved en varm romtemperatur, noe som bidrar til spiring av sporer. Når miljøet er gunstig for bakterier, bidrar det til spiring av celler fra sporer, og sporer dannes ikke fra celler i dette miljøet (se bakteriesporer).

Metoden er vanligvis effektiv i praksis. Men det anses ikke som helt pålitelig - noen sporer kan overleve og senere spire og formere seg. Den brukes ikke ofte i dag, men brukes til å sterilisere noen ting som ikke tåler trykkvarme, som illustrert av plantefrø.

Tørrvarsterilisering

Tørrvarsterilisering av en artikkel er en av de tidligste former for sterilisering som er praktisert. Den bruker varm luft som enten er fri for vanndamp eller har veldig lite av den, der denne fuktigheten spiller en minimal eller ingen rolle i steriliseringsmetoden.

Metode

Tørrvariliseringsmetoden oppnås ved ledning; det er der varme blir absorbert av den ytre overflaten av en gjenstand og deretter ført innover til neste lag. Etter hvert når hele varen riktig temperatur som trengs for å oppnå sterilisering. Riktig tid og temperatur for sterilisering av tørr varme er 160 ° C i 2 timer eller 170 ° C i 1 time eller i tilfelle av høyhastighets varmluftssterilisatorer 190 ° C (375 ° F)) i 6 til 12 minutter.

Elementene skal være tørre før sterilisering, siden vann vil forstyrre metoden. Tørr varme ødelegger mikroorganismer ved å forårsake denaturering av proteiner.

Tilstedeværelsen av fuktighet, som illustrert ved dampsterilisering, øker varmeinntrengningen betydelig.

Det er to typer varmluftskonveksjon (konveksjon refererer til sirkulasjon av oppvarmet luft i ovnens kammer) sterilisatorer:

Gravitetskonveksjon

Mekanisk konveksjon

Mekanisk konveksjonsprosess

En mekanisk konveksjonsovn inneholder en vifte som aktivt tvinger oppvarmet luft gjennom alle områdene i kammeret. Strømmen som blåseren sikrer, sikrer jevn temperatur og lik varmeoverføring gjennom belastningen. Av denne grunn er den mekaniske konveksjonsovnen mer effektiv av de to prosessene.

Varmluft med høy hastighet

Et enda mer effektivt system enn konveksjon bruker forstøvet varmluft tvunget gjennom et jetgardin på 3000 fot / minutt.

Instrumenter som brukes til tørrvarmesterilisering

Instrumenter som brukes til tørrvarmesterilisering inkluderer varmluftsovn, forbrenning eller brenning, flamming, stråling, mikrobølgeovn, bunsenbrenner og glassperleresterilisator.

Effekt på mikroorganismer

Tørrvarme lysiserer proteinene i enhver organisme, forårsaker oksidativ skade på frie radikaler, forårsaker tørking av celler, og kan til og med brenne dem til aske, som ved forbrenning.

Asepsis

Asepsis er tilstanden til å være fri for sykdomsfremkallende mikroorganismer (for eksempel sykdomsfremkallende bakterier, virus, sykdomsfremkallende sopp og parasitter). Det er to kategorier av asepsis: medisinsk og kirurgisk. Den moderne forestillingen om asepsis stammer fra de eldre antiseptiske teknikkene, et skifte initiert av forskjellige individer på 1800-tallet som introduserte praksis som illustrert ved sterilisering av kirurgiske verktøy og bruk av kirurgiske hansker under operasjoner. Målet med asepsis er å eliminere infeksjon, ikke å oppnå sterilitet. Ideelt sett er et kirurgisk felt sterilt, noe som betyr at det er fritt for alle biologiske forurensninger (f.eks. Sopp, bakterier, virus), ikke bare de som kan forårsake sykdom, forurensning eller gjæring. Selv i aseptisk tilstand kan det utvikle seg en tilstand med steril betennelse.Begrepet refererer ofte til den praksis som brukes for å fremme eller indusere asepsis i et operativt felt av kirurgi eller medisin for å forhindre infeksjon.

Handling

Asepsis refererer til enhver operasjonsmåte som utføres under sterile forhold. Dette inkluderer medisinske og laboratorieteknikker (for eksempel med bakteriekulturer). Det er to typer asepsis - medisinsk og kirurgisk. Medisinsk eller ren asepsis reduserer antall organismer og forhindrer spredning av dem; kirurgisk eller steril asepsis inkluderer prosedyrer for å eliminere mikroorganismer fra et område og praktiseres av kirurgiske teknologer og sykepleiere. Til syvende og sist avhenger vellykket bruk av aseptiske operasjoner av en kombinasjon av forberedende handlinger. Så som sterilt utstyr og væsker blir brukt under invasive medisinske og sykepleieprosedyrer. Den største manifestasjonen av slike aseptiske teknikker er i sykehusets operasjonssentre, hvor målet er å holde pasienter fri fra sykehusets mikroorganismer.

Mens alle medlemmer av det kirurgiske teamet skal demonstrere god aseptisk